产品货号:
HR0187
中文名称:
真菌蛋白提取试剂盒(双向电泳用)
英文名称:
Fungal protein extraction kit(2D electrophoresis)
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒适用于从各种真菌中提取总蛋白。优化的裂解液配方可以充分释放各种真菌样本蛋白,提取过程简单方便,可在1小时内完成。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白用于二维电泳。如需要用于SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、报告基因检测、酶活分析等下游实验的试剂盒,请联系本公司,选择其他货号产品。
组分 | 50T | 100T |
试剂A:真菌蛋白提取液 | 25mL | 50mL |
试剂B:蛋白酶抑制剂混合物 | 100μL | 200μL |
保存:蛋白酶抑制剂-20℃保存,蛋白提取液室温保存,有效期1年。
移液器、离心机、涡旋振荡器
- 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
- 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
- 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
- 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
- 提取液制备:每500μL真菌蛋白提取液中加入2μL蛋白酶抑制剂混合物,混匀后备用。
- 取培养真菌样本,在4℃,3000×g条件下离心5~10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集菌体。
注:菌体数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。 - 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
- 将菌体置于研钵中用液氮研磨5分钟左右至粉末。若无液氮研磨条件,可直接用蛋白提取液研磨。
- 每100mg菌体中加入500μL蛋白提取液,混匀后,振荡30~45分钟。
- 在14000×g条件下离心15分钟。
- 将上清吸入另一干净离心管,即可得到真菌总蛋白。
- 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
注:蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
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